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NGS科研用建库试剂盒
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K02422-S/L/L10 DNA Seq Library Preparation Kit – Illumina Compatible

流程介绍
       新一代Gnomegen DNA测序文库构建试剂盒是在高通量测序领域中应用广范的文库构建产品,它可以实现各种来源的基因组DNA、大片段扩增子和mRNA逆转录形成的双链cDNA的快速文库构建,适用于Illumina平台的高通量测序。

流程图

特色与优势
• 简单,一步完成末端修复和加dA尾;
• 快速,整个流程仅需4-5小时;
• 自动化兼容,可实现自动化高通量建库。
 
产品信息
 

货号

产品名

规格

K02422-S

DNA Seq Library Preparation Kit – Illumina Compatible

12 rxn

K02422-L

DNA Seq Library Preparation Kit – Illumina Compatible

48 rxn

K02422-L10

DNA Seq Library Preparation Kit – Illumina Compatible

480 rxn


常见问题解答
 
1. DNA样品制备整个流程需要多长时间?
      这是一个简便的流程,一般6-8小时即可完成。
 
2. DNA文库制备的注意事项有哪些?
      DNA文库制备通常是一个成熟,优化过的流程。能出错的地方不多。但因为步骤多,累积的回收率往往就是问题了。这就是我们的建库流程尽量减少纯化步骤的原因。
 
3. DNA文库构建,对PCR循环数有要求吗?
      这是一个在高通量测序应用中被反复讨论的话题。我们的体会是:根据需要,没有严格的规定。通常,PCR循环数越少越好,因为大家知道PCR会对样品的组成带来偏差。所以,建议用户尽量选择灵敏的定量方法,以减少PCR循环数。
 
4. DNA随机断裂有哪些方法?
       DNA随机断裂通常有物理断裂和酶切两大类。我们的体会是物理断裂随机性好,在一定范围内,不太会受样品的纯度,初始量的影响,是比较理想的选择。我们开发和优化了利用酶切法做DNA随机断裂的试剂和方法,这对于有经验的用户,是一个成本低,通量高的解决方式。
 
5. DNA文库制备的起始量多少?
      建库所需的DNA初始量是测序目的决定的:例如人的基因组,如果研究目的是寻找发生概率很低的和疾病相关的变异,则对测序的深度和DNA初始量有很高的要求。而如果是进行两条染色体上同一位点,不同基因型的区分,则不需要前一种情况那么多的DNA样品。除此之外,基因组的大小也是影响因素,通常小基因组,如微生物基因组,在很低的初始量下,也可以获得很好的基因水平差异信息。通常情况,100ng到1ng的DNA,就可以产生足够的文库。DNA初始量更低,也是可以建库成功的,只是得到的数据的覆盖度会有差异。不同厂商的产品因为具体流程和效率有些不同,在相同DNA初始量的情况下,文库产率也会有差别。
 
6. DNA Seq文库制备的流程和IlluminaTruSeq有哪些不同?
      DNA Seq 文库制备的流程和IlluminaTruSeq基本一样,包括DNA随机断裂,末端修饰,加A尾,接头连接,PCR扩增,以及纯化并筛选所需大小的文库片段几个步骤。我们流程的特色在于将末端修饰,加A尾并为一步反应,将DNA建库流程稍作简化。
 
 
 

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