我们的Ion torrent平台DNA文库构建的试剂盒的barcode是和life 匹配的，一共96个。

 

      操作流程不同，Ion Torrent的文库构建采用的是钝端连接，具体请参照前面的操作流程。

 

      这是一个简便的流程，4-5小时即可完成。

 

      DNA文库制备通常是一个成熟，优化过的流程。能出错的地方不多。各种产品之间差别不大。更多的是用户要从项目层面了解建库要求，及对初始量和循环数的控制，以提高覆盖度，均一性并减少因扩增造成的假阳性突变。

 

     这是一个在高通量测序应用中被反复讨论的话题。我们的体会是：根据需要，没有严格的规定。通常，PCR循环数越少越好，因为大家知道PCR会对样品的组成带来偏差。所以，建议用户尽量选择灵敏的定量方法，以减少PCR循环数。

 

      建库所需的DNA初始量是测序目的决定的：例如人的基因组，如果研究目的是寻找发生概率很低的和疾病相关的变异，则对测序的深度和DNA初始量有很高的要求。而如果是进行两条染色体上同一位点，不同基因型的区分，则不需要前一种情况那么多的DNA样品。除此之外，基因组的大小也是影响因素，通常小基因组，如微生物基因组，在很低的初始量下，也和以获得很好的基因水平差异信息。通常情况，100ng到1ng的DNA，就可以产生足够的文库。DNA初始量更低，也是可以建库成功的，只是得到的数据的覆盖度会有差异。不同厂商的产品因为具体流程和效率有些不同，在相同DNA初始量的情况下，文库产率也会有差别。